产品列表PRODUCTS LIST
1 仪器和试药
液相色谱；TCQ-250超声波清洗仪（北京医疗设备二厂）；电子天平AEG-220紫外分光光度仪UV-265甲醇为优级纯；乙腈为色谱纯；其他试剂均为分析纯；苦参碱对照品由中国药品生物制品检定所提供（批号：110805-200306）。
2 方法与结果
2．1 色谱条件
Diamonsil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相乙腈-甲醇-磷酸盐溶液（25∶10∶65）；检测波长220 nm；流速1 ml/min；柱温25 ℃。
2．2 供试品溶液的制备
取本品50 ml，摇匀，精密量取5 ml，加浓氨试液调pH＝10后，用氯仿（30、30、30、20、20 ml）提取5次，合并提取液，挥干氯仿，加甲醇适量溶解残渣，滤过，滤渣、容器用甲醇洗涤3次，每次5 ml，合并洗液与滤液，定量转移至100 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2．3 对照品溶液的制备
取经P2O5减压干燥至恒重的苦参碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每毫升约含0.530 mg的对照品溶液。
2．4 阴性对照品溶液的制备
取缺苦参总生物碱的样品适量，依供试品溶液的制备法，制备阴性对照品溶液。
2．5 系统适用性试验
分别取对照品溶液、阴性对照品溶液、供试品溶液各10 μl注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，有相同保留时间的色谱峰，阴性对照无干扰。理论塔板数为8 128。
2．6 线性关系考察
精密称取苦参碱对照品适量，依对照品溶液制备法制备浓度0.106、0.318、0.530、0.742、0.954 g/L的溶液，分别精密吸取上述溶液5 μl，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，对照品质量为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为：Y=38788X－53（r=0.999 8），表明苦参碱在0.53~4.77 μg呈线性关系。
2．7 精密度试验
精密吸取上述苦参碱对照品溶液，重复进样5次，测定苦参碱峰面积，RSD为1.58%，表明精密度良好。
2．8 稳定性试验
精密量取本品适量，依供试品溶液制备法制备供试品溶液，再精密吸取供试品溶液10 μl，依上述色谱条件在0、2、4、6、8 h分别进行测定，记录峰面积，RSD为1.49%，表明供试品溶液在8 h内基本稳定。
2．9 重复性试验
分别精密量取同一样品5份，依供试品溶液制备法制备5份供试品溶液，精密吸取供试品溶液各10 μl，依上述色谱条件测定，RSD为0.95%，表明该方法的重复性良好。
2．10 加样回收率试验
精密量取0.5 ml已知含量（35.767 g/L）的妇得康洗剂5份，分别添加苦参碱对照品适量，按上述供试品溶液制备法制备加样回收供试品溶液，并进行测定，计算回收率，见表1。结果苦参碱的平均回收率为98.6%，RSD为1.17%。
2．11 样品测定
精密量取样品适量，依供试品溶液制备法制备供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液5 μl与供试品溶液10 μl注入液相色谱仪，依上述色谱条件测定，记录苦参碱峰面积，重复测定2次，取平均值。结果见表2。表1 苦参碱的加样回收率试验结果2 10批样品中苦参碱的含量
3 讨论
3．1 检测波长的选择
精密称取干燥至恒重的苦参碱对照品适量，用流动相溶解配成标准溶液，对苦参碱标准溶液进行全波长扫描，结果表明标准溶液在200 nm处有zui大吸收，考虑紫外吸收末端干扰大，且样品中苦参碱含量高，故选择检测波长为220 nm。
3．2 流动相的选择
选择了3种流动相：（1）乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液（1∶9），氢氧化钠溶液调节pH至6.0；（2）乙腈-0.005 mol/L庚烷基磺酸钠溶液（25∶75）；（3）乙腈-甲醇-磷酸盐溶液（25∶10∶65）。经多次测试结果表明，流动相（1） 峰分离不好，流动相（2）的峰型不好，出现脱尾现象，流动相（3）出峰时间合理，峰型好，分离度大于1.5。
3．3 萃取次数的考察
取洗剂5 ml，加浓氨试液调pH＝10后，分别用氯仿（30、30、30、20、20、20 ml）提取3、4、5、6次，合并提取液，挥干氯仿，加甲醇适量溶解残渣，滤过，滤渣，容器用甲醇洗涤3次，每次5 ml，合并洗液与滤液，定量转移至100 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，通过比较峰面积，5次萃取基本可将苦参碱萃取*。
